而损伤、凋亡与死亡的细胞就会产生并被组织给剔除出来。
很显然,现在存活的t细胞数量显然不够接下来的研究与实验消耗。
这算是开门黑吗?
还没开始正式实验就倒在了第一步。
可做研究往往就是这样,你永远不知道下一秒会发生什么。
陆时羡振作精神,开始回过头来检查自己的实验设计。
但思考再三,他的实验设计并没有什么逻辑性的错误,就算有一些细微的缺陷,也不会造成这种结果。
他开始回忆自己的实验操作。
苦苦思索中,他最后终于找到了罪魁祸首。
种原代细胞的孔板!
他选择的数量太少,对于他实验所需要的t细胞而言,最适宜的应该是96孔,而他选择的是常用的24孔板。
这样就会分布的比较均匀,不会因为刚刚的局部拥挤而发生溢出效应。
果然还是对细胞实验不太熟悉啊!
陆时羡在心里暗暗想道,然后轻吐一口气出来。
得了!又要重新开始做了。
陆时羡为马玉恒的实验室因此烧掉的经费心痛了一秒钟。
然后,再次开始了他的操作。
又是四天之后。
果不其然,这次的细胞培养的非常成功。
陆时羡在空中挥舞一下手臂,算是庆祝自己终于踏出了第一步。
接下便是进行正式的实验了。
接下来就需要制造炎症条件了。
所有能够引起组织损伤的因素都能够引发炎症,包括生物性因素、非生物性因素、进入人体的异物以及潜在的致炎因子。
根据陆时羡现在的了解,目前主流的炎症模式一共有两种:感染性炎症模型和非特异性炎症模型。
感染性炎症常见于流感与病毒导致的肺炎,陆时羡在文献里见过的只有克雷伯杆菌重症肺炎模型。
非特异性炎症的模型最多,能够在实验中观察到炎症在不同时间的过程,包括急性炎症与慢性炎症。
但是陆时羡这次的主角并不是炎症,自然不需要什么快慢,也不需要什么模型。
如果他能研究一个感染模型出来,那这本身就能算得上一个不错的成果。
可现在他所需要的只是一个炎症环境,用已经准备好的病毒对小鼠进行感染即可。
这也是最朴实无华的方法。
将已经喂养不少天的小鼠进行感染之后,陆时羡分别在不同时间点收集了它的一些关键组织。
在多聚甲醛溶液中固定,用石蜡进行包埋,接下来进行切片,来到了最关键的环节。
免疫组化实验!
接下来,他只需要观察病毒感染下,t细胞表达之后,标志物数量指标以及t细胞活化因子和促炎因子究竟存在什么关系就行了。
免疫组织化学实验的原理是抗体和抗原之间存在高度特异性,从而达到对组织及细胞中的未知抗原进行定性或者定量的实验研究。
常用的大概是免疫荧光法、免疫酶法和免疫铁蛋白法等等。
陆时羡满心希望的开始下来的操作。
可一个小时后!
新的问题出现了!
那就是t细胞的种类太多了,会表达出太多的亚群。
这样需要测定参数的细胞数量实在太过于庞大,所需要耗费的时间太多了。
显然他一个人无法完成这样的巨大工作量。
而损伤、凋亡与死亡的细胞就会产生并被组织给剔除出来。
很显然,现在存活的t细胞数量显然不够接下来的研究与实验消耗。
这算是开门黑吗?
还没开始正式实验就倒在了第一步。
可做研究往往就是这样,你永远不知道下一秒会发生什么。
陆时羡振作精神,开始回过头来检查自己的实验设计。
但思考再三,他的实验设计并没有什么逻辑性的错误,就算有一些细微的缺陷,也不会造成这种结果。
他开始回忆自己的实验操作。
苦苦思索中,他最后终于找到了罪魁祸首。
种原代细胞的孔板!
他选择的数量太少,对于他实验所需要的t细胞而言,最适宜的应该是96孔,而他选择的是常用的24孔板。
这样就会分布的比较均匀,不会因为刚刚的局部拥挤而发生溢出效应。
果然还是对细胞实验不太熟悉啊!
陆时羡在心里暗暗想道,然后轻吐一口气出来。
得了!又要重新开始做了。
陆时羡为马玉恒的实验室因此烧掉的经费心痛了一秒钟。
然后,再次开始了他的操作。
又是四天之后。
果不其然,这次的细胞培养的非常成功。
陆时羡在空中挥舞一下手臂,算是庆祝自己终于踏出了第一步。
接下便是进行正式的实验了。
接下来就需要制造炎症条件了。
所有能够引起组织损伤的因素都能够引发炎症,包括生物性因素、非生物性因素、进入人体的异物以及潜在的致炎因子。
根据陆时羡现在的了解,目前主流的炎症模式一共有两种:感染性炎症模型和非特异性炎症模型。
感染性炎症常见于流感与病毒导致的肺炎,陆时羡在文献里见过的只有克雷伯杆菌重症肺炎模型。
非特异性炎症的模型最多,能够在实验中观察到炎症在不同时间的过程,包括急性炎症与慢性炎症。
但是陆时羡这次的主角并不是炎症,自然不需要什么快慢,也不需要什么模型。
如果他能研究一个感染模型出来,那这本身就能算得上一个不错的成果。
可现在他所需要的只是一个炎症环境,用已经准备好的病毒对小鼠进行感染即可。
这也是最朴实无华的方法。
将已经喂养不少天的小鼠进行感染之后,陆时羡分别在不同时间点收集了它的一些关键组织。
在多聚甲醛溶液中固定,用石蜡进行包埋,接下来进行切片,来到了最关键的环节。
免疫组化实验!
接下来,他只需要观察病毒感染下,t细胞表达之后,标志物数量指标以及t细胞活化因子和促炎因子究竟存在什么关系就行了。
免疫组织化学实验的原理是抗体和抗原之间存在高度特异性,从而达到对组织及细胞中的未知抗原进行定性或者定量的实验研究。
常用的大概是免疫荧光法、免疫酶法和免疫铁蛋白法等等。
陆时羡满心希望的开始下来的操作。
可一个小时后!
新的问题出现了!
那就是t细胞的种类太多了,会表达出太多的亚群。
这样需要测定参数的细胞数量实在太过于庞大,所需要耗费的时间太多了。
显然他一个人无法完成这样的巨大工作量。